Les glucides sont essentiellement des hydrates cycliques de carbone (CN (H2O) N) mais peuvent aussi porter N, S, P. Les cycles ont habituellement une longueur de 5 ou 6 atomes et forment des macromolécules lorsque les cycles se lient. Un exemple est la cellulose, qui est présente dans les parois des légumes. En tant qu’êtres […]
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Chapitre 1 : La réplication de l’ADN
Bien avant que la structure de l’ADN ne soit connue, les scientifiques se sont interrogés sur la capacité des organismes à créer des copies fidèles d’eux mêmes et, plus tard, sur la capacité des cellules à produire plusieurs copies identiques de macromolécules complexes. La spéculation à propos de ces problèmes était centrée sur le concept […]
Chapitre 10 : Transfert de Southern ou hybridation de Southern
Introduction : Le transfert de Southern est l’une des techniques centrales en biologie moléculaire. D’abord mis au point par E M Southern (1975), le transfert de Southern a pour résultat le transfert de molécules d’ADN, habituellement des fragments de restriction, d’un gel d’électrophorèse à une feuille de nitrocellulose ou de nylon, de telle sorte que […]
Chapitre 9 : les enzymes capables d’agir sur l’ADN
Les enzymes agissant sur l’ADN peuvent être regroupées en quatre grandes classes, en fonction du type de réaction qu’elles catalysent: 1) Les nucléases sont des enzymes qui coupent, raccourcissent ou dégradent les molécules d’acide nucléique. 2) Les ligases rejoignent les molécules d’acide nucléique. 3) Les polymérases produisent des copies des molécules. 4)Les enzymes modificatrices éliminent […]
Chapitre 8 : Les vecteurs de Clonage pour animaux
Des efforts considérables ont été déployés pour développer des systèmes de vecteurs pour le clonage des cellules animales. Ces vecteurs sont nécessaires en biotechnologie pour la synthèse de protéines recombinantes à partir de gènes qui ne sont pas exprimés correctement lorsqu’ils sont clones dans E. coli ou la levure et les méthodes de clonage chez […]
Chapitre 7 : Préparation de l’ADN cellulaire total
Les principes fondamentaux de la préparation de l’ADN sont plus faciles à comprendre en examinant d’abord le type le plus simple de procédure de purification d’ADN, celui où le complément d’ADN entier d’une cellule bactérienne est nécessaire. Les modifications nécessaires pour la préparation d’ADN de plasmide et de phage peuvent ensuite être décrites ultérieurement. La […]
Chapitre 6 : PCR (Polymerase Chain Reaction)
La PCR est une technique très simple: tout ce qui se passe est qu’une petite région d’une molécule d’ADN, par exemple un seul gène, est copiée à plusieurs reprises par une enzyme ADN polymérase. Cela peut sembler un exercice plutôt trivial, mais il a une multitude d’applications dans la recherche génétique et dans des domaines […]
Chapitre 5 :Vecteurs de clonage pour les plantes
Ces vectors de clonage ont été développés dans les années 80 et leur utilisation a conduit à la culture des OGM (organismes génétiquement modifiées). Trois types de vecteurs ont été utilisés avec plus ou moins de succès pour le clonage des Plantes : Vecteurs à base de plasmides naturels d’Agrobacterium. Transfert direct de gène en utilisant […]
Chapitre 4 : Vecteurs de clonage pour les eucaryotes: levures et autres champignons
La levure Saccharomyces cerevisiae est l’un des organismes les plus importants dans la biotechnologie. Outre son rôle dans le brassage et la fabrication du pain, la levure a été utilisé comme un organisme hôte pour la production de produits pharmaceutiques importants à partir de gènes clonés. Dans un premier temps le développement des vecteurs de […]
Chapitre 3 : la remise de l’ADN cloné dans la cellule
Mettre l’ADN dans les cellules Après que la séquence d’ADN à cloner a été joint au vecteur approprié, l’hybride doit être transféré dans des cellules pour l’amplification biologique. Le phénomène de la transformation des pneumocoques par l’ADN est connue depuis 1944. Une fois les propriétés génétiques souhaitables d’ E.coli ont été réalisées, elle aussi a été testée […]